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Editorial

Principais patógenos e susceptibilidade in vitro antimicrobiana em ceratites bacterianas: Revisão de cinco anos, 2005 a 2009

Main pathogens and in vitro antimicrobial susceptibility in bacterial keratitis: 5-year study, 2005-2009

Guilherme Andrade do Nascimento Rocha1; Reinaldo Ferreira da Silva1; Mayana Freitas Lopes1; Nicolas Cesário Pereira1; Luciene Barbosa de Sousa1

DOI: 10.1590/S0004-27492011000100007

RESUMO

OBJETIVO: Determinar os principais patógenos envolvidos na etiologia das ceratites bacterianas no Hospital Oftalmológico de Sorocaba/SP e a susceptibilidade in vitro dos principais antimicrobianos utilizados no tratamento desta afecção ocular. MÉTODOS: Estudo retrospectivo de todos os prontuários submetidos a exame microbiológico por suspeita de ceratite infecciosa, atendidos no Hospital Oftalmológico de Sorocaba/SP, entre 2005 e 2009. Para testar a susceptibilidade dos antimicrobianos, foram realizados antibiogramas através do método padrão de difusão em discos e a interpretação da sensibilidade foi realizada seguindo-se a padronização do National Committee on Clinical Laboratory Standards (NCCLS, Villanova, PA, USA). RESULTADOS: De 963 coletas, 278 (28,86%) foram positivas para algum patógeno. Dentre as coletas positivas para bactérias, os principais patógenos identificados foram: Staphylococcus aureus (30.56%), Staphylococcus epidermidis (30,56%), Streptococcus sp (9,43%) e Pseudomonas sp (9,43%). No total, 191 (72,08%) dos patógenos identificados eram Gram-positivos e 74 (27,92%) eram Gram-negativos. O exame laboratorial evidenciou altos índices de sensibilidade para a maioria dos antimicrobianos (acima de 85%), com exceção da cefalotina (53,13%). Os maiores índices de resistência foram observados com a cefalotina (33,47%) e a ciprofloxacina (11,36%). CONCLUSÕES: Bactérias Gram-positivas foram as principais isoladas nos exames microbiológicos neste estudo, com número expressivo de estafilococos, apesar de um crescente número de bactérias Gram-negativas como principais patógenos isolados, principalmente representado por Pseudomonas, relacionado ao uso disseminado de lentes de contato. O exame laboratorial evidenciou altos índices de sensibilidade para a maioria dos antimicrobianos (acima de 85%), com exceção da cefalotina (53,13%). Os maiores índices de resistência foram observados com a cefalotina (33,47%) e a ciprofloxacina (11,36%). Diante desta variabilidade importante tanto de principais patógenos envolvidos na etiologia da ceratite bacteriana como de susceptibilidade antimicrobiana, torna-se muito importante saber qual o perfil das infecções com as quais estamos lidando, para que tal afecção seja conduzida da maneira correta, seguindo-se a individualidade de cada localidade.

Descritores: Infecções oculares bacterianas; Testes de sensibilidade microbiana; Ceratite; Resistência microbiana a drogas

ABSTRACT

PURPOSE: To determine the most common pathogens involved in the etiology of bacterial keratitis at the Sorocaba Ophthalmological Hospital and the in vitro susceptibility of main antimicrobial used in the treatment of this pathology. METHODS: Retrospective study of all patients suspected of infectious keratitis that underwent microbiological exam at the Sorocaba Ophthalmological Hospital, between 2005 and 2009. To test susceptibility of antimicrobial drugs, antibiograms were made through the standard method of discs diffusion and interpretation following the National Committee on Clinical Laboratory Standards (NCCLS, Villanova, PA, USA). RESULTS: 963 samples were obtained in this period and 278 (28.86%) were positive for some pathogen. Among the positive for bacteria, the most common were Staphylococcus aureus (30.56%), Staphylococcus epidermidis (30.56%), Streptococcus sp (9.43%) and Pseudomonas sp (9.43%). Dividing in Gram's method, 191 (72.08%) were Gram-positive and 74 (27.92%) were Gram-negative. Analyzing in vitro antimicrobial effectiveness, the majority presented good susceptibility rates, beyond 85%, except cephalotin which presented 53.13%. At the same analysis, higher resistance rates with cephalotin (33.47%) and ciprofloxacin (11.36%) were noted. CONCLUSION: Gram-positive bacteria were the most common pathogen isolated at microbiologic exams, especially staphylococci. despite the increasing number of isolated Gram-negative bacteria, meanly represented by Pseudomonas, related with the widespread use of contact lenses. Laboratorial exam revealed high sensibility values for most of antibiotics (more than 85%), except for cephalotin (53.13%). Higher resistance values were observed with cephalotin (33.47%) and ciprofloxacin (11.36%). With all these important variability of antibiotic susceptibility and pathogens involved in bacterial keratitis etiology, it is very important to know the specific characteristics of each infection for a better patient casre.

Keywords: Eye infections, bacterial; Microbial sensitivity tests; Keratitis; Drug resistance, microbial


 

 

INTRODUÇÃO

Ceratite bacteriana é uma condição comum e prevenível de morbidade visual. Alguns casos apresentam aparecimento rápido e inflamação estromal progressiva. A gravidade da infecção depende da condição corneana prévia e da patogenicidade do micro-organismo envolvido. Se não tratada, normalmente leva à destruição tecidual progressiva com perfuração corneana ou extensão para tecidos adjacentes.

Uma grande variedade de patógenos pode estar envolvida em ceratites. A prevalência de um organismo depende da localização geográfica, fatores climáticos e de fatores de risco para a infecção(1-4). Até recentemente, a maioria dos casos estava relacionada a traumas oculares e/ou doenças ou cirurgias da superfície ocular. Entretanto, o uso indiscriminado de lentes de contato aumentou consideravelmente a incidência de ceratite nestas pessoas, passando a ser o principal fator de risco, na maioria dos estudos atuais(1-2,5-11). Devido esta ampla variedade de agentes causadores, muitos com espectro de sensibilidade a antimicrobianos restritos, o oftalmologista deve considerar o uso de testes diagnósticos microbiológicos em casos selecionados(12-14).

Atualmente, não há um agente antimicrobiano efetivo contra todos os patógenos causadores de ceratites. O uso de terapia empírica de amplo espectro é recomendado até que o micro-organismo envolvido seja identificado(1,3-5,7,15). Apesar disto, a modificação da terapia inicial deve basear-se na resposta clínica e não no resultado de sensibilidade antimicrobiana. A partir da ausência de melhora clínica, a utilização de um regime alternativo deve ser considerada, orientada pelo resultado do exame(1,3,7,15).

Este trabalho tem como objetivo determinar os principais patógenos envolvidos na etiologia das ceratites bacterianas e a susceptibilidade in vitro dos principais antimicrobianos utilizados no tratamento desta afecção ocular.

 

MÉTODOS

Estudo retrospectivo de todos os prontuários submetidos a exame microbiológico por quadro suspeito de ceratite infecciosa, atendidos no Hospital Oftalmológico de Sorocaba/SP, no período de 2005 e 2009. Os exames microbiológicos foram realizados conforme os seguintes critérios: (1) lesões > 3 mm; (2) próxima ao eixo visual; (3) perfuração ou iminência de perfuração; (4) comprometimento escleral; (5) utilização prévia de antimicrobianos sem resposta clínica; (6) história prévia de doenças oculares.

Os raspados foram feitos com auxílio de espátula de Kimura flambada na chama de lamparina e esfriada em solução estéril, à lâmpada de fenda com auxílio de blefarostato e após instilação de cloridrato de proximetacaína 0,5%. O material colhido foi destinado para: (1) cultura, semeado nas placas de ágar-sangue e ágar-chocolate; (2) bacterioscopia citológica, coradas por Gram e Giemsa; (3) meio de tioglicolato, para anaeróbios e (4) cultura para fungos em placa de ágar-Sabouraud. Durante a coleta, o material necrótico era desprezado e as amostras colhidas das bordas e da região profunda da lesão.

Para testar a susceptibilidade dos antimicrobianos, foram realizados antibiogramas através do método padrão de difusão em discos e a interpretação da sensibilidade foi realizada seguindo-se a padronização do National Committee on Clinical Laboratory Standards (NCCLS, Villanova, PA, USA).

Como o exame é realizado em laboratório terceirizado, diversos antibióticos foram testados. Assim, para análise estatística, somente antibióticos com aplicação em oftalmologia foram considerados.

 

RESULTADOS

Foram realizadas 963 coletas no período entre 2005 e 2009, seguindo o critério estabelecido. Destas, 278 coletas (28,86%) foram positivas para algum patógeno, sendo 265 (95,33%) bacterianas e 13 (4,67%) fúngicas. Os resultados estão resumidos na tabela 1.

 

 

Dentre as coletas positivas para bactérias, os principais patógenos identificados foram: Staphylococcus aureus (30,56%), Staphylococcus epidermidis (30,56%), Streptococcus sp (9,43%) e Pseudomonas sp (9,43%). No total, 191 (72,08%) dos patógenos identificados eram Gram-positivos e 74 (27,92%) eram Gram-negativos.

Todas as bactérias encontradas estão descritas na tabela 2.

 

 

Através da análise dos antibiogramas, foi estudada a susceptibilidade bacteriana. Separamos conforme o método de Gram e, individualmente, avaliamos as quatro bactérias mais prevalentes nas amostras.

Os resultados estão descritos nas tabelas 3 e 4.

 

DISCUSSÃO

O fato de a ceratite infecciosa ser um quadro oftalmológico comum faz com que seu correto diagnóstico e tratamento sejam de extrema importância, diante das complicações e sequelas passíveis de ocorrer.

A identificação do patógeno através de exames microbiológicos constitui um passo importante, mas não indispensável. Trabalhos que estudaram a importância da realização de culturas demonstraram que a grande maioria das úlceras com patógenos adquiridos na comunidade, respondem bem à monoterapia com antibióticos de amplo espectro. Assim, sugerem que as culturas devem ser realizadas apenas em casos selecionados(12-14). Em nosso trabalho, alguns critérios foram obedecidos para realização dos exames, como mostrado anteriormente.

Entretanto, nem sempre é possível identificar o agente causador, e isto não deve retardar o tratamento. Em nossa estatística, obtivemos 28.86% de positividade, valor abaixo dos valores médios encontrados na literatura(1,3-6,8,10-11,15-17), havendo resultados de até 85% - 86% de positividade(1,16). Diante disto é importante questionarmos nossos índices, no intuito de melhorar a positividade, para uma melhor abordagem diagnóstica e terapêutica. Devemos lembrar que alguns fatores são capazes de alterar o resultado dos exames, como utilização prévia de antibióticos(1,5,7); uso inadvertido pelo paciente ou uso durante a coleta de colírio anestésico com preservativos, que tem ação bactericida, diminuindo o número de patógenos(5,18) ; amostra de material pequena; transporte e armazenagem inadequados; cultivo em meios inadequados.

As principais bactérias isoladas foram Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus sp e Pseudomonas sp, sendo os dois primeiros os mais encontrados (30,56% cada). Os patógenos Gram-positivos somaram 73,23% e os Gram-negativos, 26,77%, com Pseudomonas sp sendo o principal Gram-negativo isolado, com 9,43%. Na maioria das séries, o principal patógeno isolado também foi Staphylococcus sp(1,3-5,10,16,19-20), mas em outros houve predomínio de Pseudomonas sp(6,9,11,17,21-22). Este aumento tem provável relação com a maior participação do uso de lentes de contato como fator de risco, pois Pseudomonas sp é o principal micro-organismo isolado nestes casos(1,5-9,11,22). Quando analisamos estudos brasileiros, os resultados são similares aos nossos, com predomínio de Staphylococcus sp(10,19-20), o que mostra uma real influência geográfica na etiologia das ceratites.

Os testes de susceptibilidade in vitro devem ser analisados cuidadosamente(12-14). É importante lembrar que o comportamento de uma bactéria in vitro não corresponde necessariamente a seu comportamento in vivo, daí a importância da resposta clínica no seguimento terapêutico.

Analisando a atuação dos antimicrobianos, a maioria apresenta bons índices de sensibilidade, acima de 85%, exceto pela cefalotina, que apresenta índice de sensibilidade de 53,13%. Na mesma análise, observam-se maiores índices de resistência para cefalotina (33,47%) e ciprofloxacina (11,36%).

Dividindo os patógenos conforme o método de Gram, o resultado não foi diferente:

• Gram-positivos: a maioria dos antimicrobianos mantém bons índices de sensibilidade, superiores a 88%, com exceção da cefalotina, que apresenta 66,08%. Avaliando-se os índices de resistência, a cefalotina permanece com os maiores índices, 19,88%, seguida pela ciprofloxacina, com 8,64%.

• Gram-negativos: a maioria continua com bons índices de sensibilidade, acima de 80%, exceto pela cefalotina e cloranfenicol, com 20,28% e 56,36%, respectivamente. Entretanto, os índices de resistência são maiores para todos os antibióticos estudados, sendo a cefalotina, cloranfenicol e ciprofloxacina, respectivamente com 68,11%, 20% e 18,03%, os maiores índices.

No estudo individual de cada bactéria, alguns pontos merecem atenção:

Staphylococcus aureus apresentou boa sensibilidade a todos antibióticos estudados, com resistência pouco maior à ciprofloxacina (10,14%) e tobramicina (10,12%);

Staphylococcus epidermidis apresentou maior sensibilidade que Staphylococcus aureus, porém apresentou baixa sensibilidade (49,31%) e maior resistência (34,24%) à cefalotina, teoricamente um bom agente contra Gram-positivos;

Streptococcus sp também demonstrou boa sensibilidade à maioria dos agentes testados, exceto, novamente, pela cefalotina, com 52,17% de sensibilidade e 34,78% de resistência;

Pseudomonas sp apresentou baixos índices de sensibilidade e altos índices de resistência perante a maioria dos antibióticos testados. Apenas 8% das cepas isoladas foram sensíveis à cefalotina, enquanto 88% foram resistentes. Amicacina foi o antimicrobiano com melhor perfil de sensibilidade (84%), apesar de 16% de resistência.

Quando comparamos nossos resultados com outros estudos, percebemos a ampla variabilidade de patógenos e susceptibilidade aos antimicrobianos:

• Schaefer et al.(1) encontrou resultados semelhantes de amostras resistentes à cefalosporinas e fluorquinolonas, com 37% e 1-15%, respectivamente. Já as amostras resistentes ao cloranfenicol e aminoglicosídeos apresentaram resultados maiores, com 18% e 13-22%, respectivamente.

• Butler et al.(4) obteve taxa de sensibilidade à cefalotina bem diferente da nossa, não sendo de 100% apenas para Staphylococcus coagulase-negativo, com 78,3%. Outra diferença foi a ausência de resistência à ciprofloxacina e gentamicina por Pseudomonas. Já para ciprofloxacina, houve algumas amostras de Staphylococcus resistentes, mas a maioria foi sensível, com resultados bem próximos aos nossos.

• Yeh et al.(15) obteve 24% de resistência à cefalosporina nas amostras testadas de S. aureus e <5% nos antibióticos testados para Gram-negativos. Estes resultados foram opostos aos nossos, pois obtivemos apenas 1.49% de resistência à cefalotina nas amostras de S. aureus e todos antibióticos testados obtiveram >5% de resistência aos Gram-negativos.

• Tan et al.(9) encontrou todos Gram-positivos sensíveis às cefalosporinas e apenas um Gram-negativo resistente à gentamicina. Obteve também todos os casos de Pseudomonas e 33,33% dos Gram-positivos resistentes ao cloranfenicol. Em nossa série, obtivemos também bons resultados com gentamicina para os Gram-negativos, mas não com as cefalosporinas para os Gram-positivos. No caso do cloranfenicol, a resistência das amostras de Pseudomonas foi a segunda maior (50%), mas a resistência dos Gram-positivos foi muito pequena (1,36%).

Cada estudo utilizou um tipo de tratamento, mas a maioria concorda com a necessidade de um tratamento inicial de amplo espectro, com uma medicação específica para patógenos Gram-positivos e outra para Gram-negativos. O esquema considerado "padrão-ouro" no tratamento das ceratites bacterianas é a combinação de gentamicina e uma cefalosporina(23). Entretanto, é demonstrado que a concentração de gentamicina diminui rapidamente e que apresenta baixa penetração ocular(1). Associado a isso, há a toxicidade epitelial com uso dos antibióticos fortificados. Desta forma, as fluorquinolonas começaram a ser estudadas, no intuito de comprovar a eficácia e segurança de uma monoterapia.

O uso das fluorquinolonas no tratamento das ceratites bacterianas aumentou bastante nos últimos anos, principalmente após alguns estudos demonstrarem que o uso de ciprofloxacina ou ofloxacina 0.3% em monoterapia apresentou resultados semelhantes ou melhores em eficácia quando comparados à associação cefalosporina e aminoglicosídeo(21,24-25). Entretanto, o principal argumento que impede o uso de monoterapia de fluorquinolona como primeira 1ª escolha no tratamento de ceratites bacterianas é o registro por vários estudos do aparecimento de amostras resistentes, principalmente contra Streptococcus sp(1,26-27), S. aureus(27), Staphylococcus coagulase-negativo(1,26,28) e Pseudomonas sp(29). Uma provável alternativa para monoterapia seria a utilização de quinolonas de 3ª e 4ª geração, que apresentam perfil maior de cobertura para bactérias Gram-positivas. Em nosso estudo, a gatifloxacina apresentou 97,36% de sensibilidade às amostras, apenas com duas amostras resistentes, ambas de Pseudomonas sp.

Em nosso serviço, utilizamos como protocolo para todo caso onde é realizada coleta de exame microbiológico, a associação de cefalotina e ofloxacina como primeira linha de tratamento. Esta escolha é baseada no fato das cefalosporinas terem um bom perfil de atuação contra bactérias Gram-positivas, e fazer parte do "padrão-ouro" de tratamento(23) e as fluorquinolonas apresentarem eficácia comprovada, similar à associação de fortificados(21,24-25), apesar de apresentar resistência principalmente com bactérias Gram-positivas, fato teoricamente coberto pelas cefalosporinas. Tal esquema só é alterado diante de ausência de melhora clínica, utilizando-se o resultado do antibiograma para escolha do novo esquema terapêutico.

 

CONCLUSÃO

Ceratite bacteriana continua sendo uma condição com tratamento desafiador e de ameaça visual importante. O rápido isolamento e início de terapia antimicrobiana constituem passos importantes no manejo de tal patologia.

Bactérias Gram-positivas foram as principais isoladas em exames microbiológicos neste estudo, com número expressivo de estafilococos, apesar de um crescente número de bactérias Gram-negativas como principais patógenos isolados, principalmente representado por Pseudomonas, relacionado ao uso disseminado de lentes de contato.

Quando realizamos um estudo como este, em que realizamos uma comparação com outros estudos de diversas partes do mundo e que fica evidente uma variabilidade importante tanto de principais patógenos envolvidos na etiologia da ceratite bacteriana como de susceptibilidade antimicrobiana, torna-se muito importante saber qual o perfil das infecções com as quais estamos lidando, para que tal patologia seja conduzida da maneira correta, seguindo-se a individualidade de cada localidade.

Avaliando-se nossos resultados in vitro, chama a atenção de que os dois antibióticos utilizados como primeira escolha no tratamento em nosso serviço, cefalosporina + fluorquinolona, apresentam as maiores taxas de resistência, tanto quando se leva em consideração os patógenos em geral, ou quando são divididos em Gram-positivos ou Gram-negativos. Diante disto, torna-se importante a realização de um estudo para avaliação dos resultados desta terapia in vivo, para então questionar a necessidade de mudança em nossa primeira linha de tratamento, com intuito de melhorar os resultados e diminuir a morbidade visual.

 

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Endereço para correspondência:
Guilherme A. N. Rocha
Rua Nabeck Shiroma, 210 - Jardim Emília
Sorocaba (SP) - CEP 18031-060
E-mail: [email protected]

Recebido para publicação em 01.06.2010
Última versão recebida em 06.10.2010
Aprovação em 25.11.2010

 

 

Trabalho realizado no Setor de Doenças Externas e Córnea e Cirurgia Refrativa no Hospital Oftalmológico de Sorocaba - Sorocaba (SP), Brasil.
Nota Editorial: Depois de concluída a análise do artigo sob sigilo editorial e com a anuência do Dr. Roberto Freda sobre a divulgação de seu nome como revisor, agradecemos sua participação neste processo.


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