Detecção de adenovírus em "swab" oftálmico empregando protocolo rápido por reação da polimerase em cadeia

RESUMO

OBJETIVO: Vírus da família Adenoviridae estão associados com muitas síndromes clínicas, sendo conhecidos 50 sorotipos. Vírus desta família e da família Herpesviridae são os maiores responsáveis por conjuntivite viral, sendo um rápido diagnóstico importante devido ao caráter epidêmico das infecções por adenovírus. MÉTODOS: Reação em cadeia da polimerase (PCR) para adenovírus foi desenvolvida utilizando iniciadores que amplificam um fragmento de 300 bp do gene da proteína hexon do capsídeo de diversos sorotipos. A reação em cadeia da polimerase foi efetuada sem a etapa de extração de DNA. RESULTADOS: Amostras de "swabs" de córneas de sete pacientes com ceratoconjuntivite foram analisadas, sendo que uma amostra foi positiva para adenovírus. O seqüenciamento deste fragmento mostrou 100% de homologia com a seqüência do adenovírus tipo 8. CONCLUSÃO: O seqüenciamento do fragmento de 300 bp do gene do hexon permite a identificação de quase todos os sorotipos de adenovírus, incluindo aqueles relacionados com a ceratoconjuntivite epidêmica (8,19,37) e todas as amostras associadas com conjuntivite.

Descritores: Reação em cadeia da polimerase; Adenovirus humano; Ceratoconjuntivite; Infecções humanas por adenovirus; Infecções oculares virais; Infecções por herpesviridae

ABSTRACT

PURPOSE: Viruses of the Adenoviridae family are associated with many clinical syndromes, possessing 50 serotypes. These agents and viruses of the Herpesviridae family are the two major agents responsible for viral conjunctivitis, and a rapid diagnosis is important due to the epidemic character of adenoviral infections. METHODS: We developed a PCR without DNA extraction for adenovirus using primers that amplify a 300 bp fragment of the hexon capsid protein gene from many serotypes. RESULTS: Swab samples from cornea of seven patients with keratoconjunctivitis were analyzed, and one of them was PCR positive for adenovirus. The sequence of this fragment shows a 100% homology with the sequence of adenovirus type 8. CONCLUSION: Sequencing of 300 bp from the hexon gene allows to identify almost all Ad serotypes, including all serotypes related to epidemic keratoconjunctivitis (8,19,37) and almost all serotypes involved with Ad-associated conjunctivitis.

Keywords: Polymerase chain reaction; Adenoviruses, human; Keratoconjunctivitis; Adenovirus infections, human; Eye infections, viral; Herpesviridae infections

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