ABSTRACT

PURPOSE: Standardization of limbal stem cell culture of donor eyes from Eye Bank of the "Santa Casa de São Paulo". METHODS: a 4-mm² biopsy was taken from the remaning corneal-scleral ring of donor eyes, and cells obtained by dissociation were cultivated and incubated at 37° under 5% CO2 .The cells were observed during 21 days, evaluating their cell adhesion, morphology and multiplication. RESULTS: We observed cellular multiplication, morphology modification during 21 days, passing from round to polygonal form, as in vivo. CONCLUSION: This experiment showed that culture of human limbal stem cells in vitro can be performed.

Keywords: Cultured cells; Epithelial cells; Limbus corneae; Corneal epithelium; Cell adhesion; Cornea; Cell transplantation

RESUMO

OBJETIVO: Padronizar cultivo primário de células epiteliais germinativas do limbo de olhos doadores do Banco de Olhos da Santa Casa de São Paulo. MÉTODOS: Por meio de biópsias de aproximadamente 4 mm² realizadas na região do limbo cirúrgico do anel córneo-escleral remanescente de olhos doadores, foram obtidos explantes, que passaram por métodos de dissociação para obtenção de células epiteliais germinativas do limbo, as quais foram semeadas em placas de cultivo celulare encubadasna estufa a 37°C em atmosfera a 5% de CO2. As placas foram observadas em 21 dias, sendo avaliadas a aderência, a morfologia e a multiplicação celular. RESULTADOS: Observamos que as células no decorrer dos 21 dias multiplicaram-se, passando da forma arredondada inicial ao processo de dissociação, para a forma poligonal como in vivo, além de demonstrarem maior aderência à placa de cultivo. CONCLUSÃO: Neste estudo foi possível demonstrar que o cultivo de células epiteliais límbicas in vitro pode ser realizado.

Descritores: Células cultivadas; Células epiteliais; Limbo da córnea; Epitélio da córnea; Aderência celular; Córnea; Transplante celular

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