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Abstract

Objetivo: Este estudo experimental tem como objetivo investigar os efeitos do azul de tripan intracameral (TB) sobre parâmetros de estresse oxidativo e apoptose no tecido da córnea. Métodos: Trinta ratos foram divididos aleatoriamente em três grupos de 10 animais cada: grupo simulação (Grupo 1); grupo controle (Grupo 2); e grupo tratamento (Grupo 3). No grupo controle foi administrado 0,01 cc de solução salina balanceada (BSS). No grupo tratamento foi administrado 0,006 mg/0,01 cm de TB. O estado antioxidante total ( TAS) e estado oxidante total ( TOS) no tecido da córnea e sangue foram medidos e o índice de estresse oxidativo (OSI) foi calculado. Finalmente, histopatologia do tecido da córnea foi avaliada por meio da coloração para caspase-3 e -8; atividade apoptótica também foi examinada. Resultados: Os níveis de TAS, TOS e OSI das amostras de sangue não foram significativamente diferentes (p>0,05 para todos). Em comparação com os grupos simulação e controle, os níveis de TOS e OSI no tecido da córnea foram significativamente diferentes no grupo tratamento (p<0,05 para todos). Não houve diferença significativa entre o grupo simulção e o grupo controle (p>0,05). A coloração imuno-histoquímica com a caspase-3 e caspase-8 demonstrou maior atividade apoptótica no grupo tratamento do que nos grupos controle e simulação. Conclusão: Este estudo mostrou que a injeção intracameral TB é segura sistematicamente, mas pode ser tóxica ao tecido da córnea, como demonstrado através de parâmetros de estresse oxidativo e avaliação histopatológica.

Keywords: Azul tripano/administração & dosagem; Injeções intraoculares; Córnea; Estresse oxidativo; Apoptose; Animais; Ratos

Abstract

Objetivo: Avaliamos o efeito do licopeno, um carotenóide dietético e um potente anti-oxidante, sobre a inflamação ocular e estresse oxidativo em modelo de uveíte experimental. Métodos: Uveíte foi induzida por endotoxina (EIU) em ratos Sprague-Dawley por uma única injeção subcutânea de 200 ug de lipopolissacárido (LPS). A indução de EIU foi precedida por injeção intraperitoneal de licopeno em uma dose de 10 mg/kg (grupo LPS + Licopeno) ou veículo de mesmo volume (grupo LPS + Veículo), durante 3 dias consecutivos. O grupo controle positivo recebeu uma dose de 1 mg/kg de Dexametasona (grupo DEX + LPS) e o grupo controle negativo recebeu doses diárias de veículo mas sem LPS (grupo Controle Veículo). Vinte e quatro horas após a administração do LPS, os olhos foram enucleados, humor aquoso foi recolhido, e o número de células infiltrativas, a concentração de proteína, assim como os níveis de óxido nítrico (NO), fator de necrose tumoral α (TNF-α), interleucina-6 e marcadores de estresse oxidativo foram determinados no humor aquoso. Além disso, a resposta inflamatória foi avaliada clinicamente e histologicamente. Resultados: As células infiltrativas, concentração de proteína, o NO, TNF-α, interleucina-6 foram significativamente elevados no humor aquoso de ratos do grupo Grupo LPS + Veículo quando comparados ao Grupo Controle Veículo. O tratamento com licopeno diminuiu significativamente estes aumentos. Comparado ao Grupo LPS + Veículo, o licopeno reduziu significativamente as concentrações no humor aquoso dos marcadores de estresse oxidativo e NO (de 0,29 ± 0,1 μM para 0,19 ± 0,1 μM, p=0,003), o TNF-α (de 71,0 ± 22,3 ng/ml para 50,1 ± 2,1 ng/ml, p=0,043), interleucina-6 (de 121,6 ± 3,0 pg/ml para 111,1 ± 5,6 pg/ml, p=0,008). Do mesmo modo, o aumento do número de células infiltrativas no tecido uveal em seções histológicas foi significativamente inibido pelo licopeno, a pontuação inflamatória diminuiu de 2,0 ± 0,0 para 0,4 ± 0,5, p=0,001. Embora, não tenha sido estatisticamente significativo, o licopeno reduziu a contagem de células infiltrativas e a concentração de proteínas no humor aquoso. Conclusões: Estes resultados sugerem que o licopeno pode ter efeitos benéficos no tratamento da inflamação ocular, através dos seus efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes.

Keywords: Uveíte/induzido quimicamente; Endotoxinas; Estresse oxidativo; Antioxidantes; Inflamação; Citocinas; Animais; Modelos animais de doenças; Ratos